A1型かA2型を調べる方法は？【専門向け】

農大A2牛乳ブログです。第3回です。

前回は、ベータカゼインのタイプの違いを説明しました。

67番目のアミノ酸：　ヒスチジン → A1型

67番目のアミノ酸：　プロリン → A2型

でしたね。

A1型かA2型になるかは、たった1つの塩基の違い（AかC）によります。

では、この塩基の違いはどのようにして調べるのでしょうか？

今回は、我々が開発した方法を紹介します。

具体的な手順としては、以下の2つの手順からなります。

１）DNAの抽出

２）PCR

３）判定

１）ウシの毛根からDNAを抽出する

　　ウシの毛を引っこ抜きます。尾っぽの根元部分が取りやすいです。

　　↓

　　毛根部分を切り取り、エタノールで洗います。

　　↓

　　ニッポンジーン社のISOHAIRというキットを用いて、DNAを抽出します。

２）PCRを行う

　　タカラバイオ株式会社のCycleavePCRという試薬を使います。

　　この試薬を使って、リアルタイムPCRを行います。

３）判定

　　Aを検出するシグナル　→　A1型（67番目のアミノ酸がヒスチジン、コドンはCAT）

　　Tを検出するシグナル　→　A2型（67番目のアミノ酸がプロリン、コドンはCTT）

　　ウシはヒトと同様、両親から１つずつ遺伝子をもらいます。

　　なので、

　　Aを検出するシグナルのみ　→　A2/A2

　　Aを検出するシグナルとTを検出するシグナル　→　A1/A2

　　Tを検出するシグナルのみ　→　A1/A1

　　と判定します。

A2/A2ウシのみを集めて、搾乳すればそのミルクは「A2牛乳」となります。

東京農業大学　庫本高志